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viernes, 5 de febrero de 2021

ADN Recombinante artificial en LINFOMA

T: Clonación del Gen EBER-1 Virus Epstein-Barr y su expresión génica en linfomas 

O:

Determinar la presencia de transcriptos virales en linfomas, conociendo que el virus de Epstein Barr es capaz de inducir transformación, realizando screening de los recombinantes.

G:

Fragmento de ADN de hasta 10 Kb de BamHI C de la cepa B95-8 que contiene el gen EBER-1

ER:

EcoRI

EL:

Ligasa T4 (Sigma)

V:

Plásmido recombinante pBR322, pBSEBER-1  (150pb) (no viral)

CR:

Procariota (E.coli Top 10) Células neoplásicas (eucariota)

MTG:

Transformación y transfección por temperatura de 55° C

MIC:

Cultivo de las células (microbiológicos), Screening de color, hibridación y PCR


Referencia Bibliográfica: 

Ejemplo de recombinación de ácidos nucleicos en la naturaleza 

Este se recombina de manera natural por procesos como la infección viral reproducción sexual y la transformación bacteriana. En el caso de las bacterias existen tres mecanismos de recombinación: transformación, conjugación y transducción. (1)

Por ejemplo, los virus como es el caso del Epstein-Barr, transfieren su ADN envuelto en una cubierta con proteínas, entre bacterias, especies de eucariotas o virus, transfieren su material genético durante la infección. Dentro de la célula infectada, los genes se replican y dirigen la síntesis de proteínas virales. (2)

Referencia Bibliográfica: 

1. https://cdn.educ.ar/dinamico/UnidadHtml__get__3115e6c3-7a08-11e1-805a-ed15e3c494af/index.html

2. https://www.ucm.es/data/cont/media/www/pag-56185/19-La%20recombinaci%C3%B3n%20gen%C3%A9tica%20en%20procariontes.pdf





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